분변내 스테로이드 호르몬 분석에 의한 삵의 생식주기 관찰 연구

Abstract

비침습성의 분변 내 에스트로겐과 프로게스테론 대사물질 평가는 다양한 포유류의 생식 기능을 모니터링 하는데 있어서 확실히 자리잡은 접근 방법이다. 특히 소변을 이용하는 방법보다 분변을 이용하는 방법은 놓아서 기르는 동물의 배설물 채취에 용이하며, 적절한 조치만 취한다면 장기간 시료를 보관할 수 있다. 본 연구에서는 삵에게 최대한 스트레스를 주지 않는 적절한 방법으로 시료를 채취하고, 생식 주기의 변화를 방사 면역 측정법 (Radio Immunoassay, RIA)을 이용하여 측정하였다. 6개월 동안 1주일에 3~5회 시료를 수집하였고, 수집 즉시 -70℃의 초저온 냉동고로 냉동하였다. 일정한 저장 시기 후에 동결 건조하여 다시 냉동 보관하였다. 동결 건조한 시료를 분쇄하여 가루로 만든 후, 에테르를 용매로 하여 스테로이드를 추출하였다. 추출한 시료를 3H 방사선동위원소 RIA 방법으로, 시료 내의 steroid hormone들인 estrogen(fE2), progesterone(fP4), testosterone(fT)의 농도를 측정하였다. 측정 농도의 범위는 각각 0~10 ng/g이다. 월별 평균 fE2의 값은 12월에 2.29 ± 0.25 ng/g, fP4의 값은 같은 달에 3.38 ± 1.07 ng/g, fT의 값은 2004년 11월에 2.69 ± 0.26 ng/g의 측정값으로 가장 높게 나타났다. fE2와 fP4 호르몬 변화는 교배가 가능한 시기인 12월에 높게 측정되었다. 이 실험으로 비침습성의 분변을 이용하여 스테로이드 호르몬을 측정하여 각 호르몬들의 특징과 상관 관계를 살펴볼 수 있었고, 이러한 방법이 혈액 채취를 통한 호르몬 측정과 함께 적용되어 그 차이를 확인한다면 동물에게 스트레스를 유발하지 않고 동물의 생식 주기 측정, 가임기 예상 등의 산과적 문제에 효과적으로 접근할 수 있을 것이다.; Non-invasive estimation of fecal estrogen and progesterone metabolites certainly stabilized method to monitor the mammalian reproductive ability. Especially, using feces rather than urine is easier for collecting excrement of the grazing animal. And if samples are properly managed, it can possibly store for long periods. At this research, samples are collected using minimal stressful means for a leopard cat. The change of reproductive period measured Radioimmunoassay (RIA). During 6 months, samples were collected at 3 to 5 times for a week, immediately stored at -70℃ deep freezer, and changed for the freeze dried samples. After that, samples were grinded to the powder, extracted steroids using ether as a solvent. Extracted samples measured using the 3H-labeled RIA kits for the concentration of the sex steroid hormones such as estrogens (fE2), progesterones (fP4), and testosterones(fT). The province of assay was 0~10 ng/g for each. The monthly average value of the fE2 was 2.29 ± 0.25 ng/g at December, the value of fP4 was 3.38 ± 1.07 ng/g at same month, the value of fT was the highest 2.69 ± 0.26 ng/g at November, 2004. Hormonal change of fE2 and fP4 highly estimated at December, the breeding period. Through these research as estimation of the steroid hormone using the noninvasive fecal sample, monitored the character of each hormonal value and the correlation of each other. Together with these methods and hormonal measurement through bleeding, effective may approach to the gynecological problems such as measurement of animal reproductive period, estimation of the breeding possibility.