Cyclosporine A에 의해 과증식된 조직의 치은섬유아세포에서 MMP-1, TIMP-1, TGF-β₁, FGF-2, 그리고 FGF-7의 mRNA 발현에 관한 연구

Abstract

목적 : Cyclosporine (CsA)은 가장 일반적으로 사용되는 면역억제제로 비정상적인 치은증식을 야기하는 것으로 알려져 있다. CsA에 의한 치은 증식과 관련된 원인은 아직 밝혀지지 않고 있지만, 치은섬유아세포의 교원질 생성 및 분해 기전과 관련이 있다는 보고 들이 있다. 본 연구는 이러한 여러 성장인자가 CsA의 농도 및 자극 시간의 변화에 따라 발현되는 양상을 관찰하여 치은증식과 교원질 생성 및 분해기전의 관련성을 알아보고자 한다. 방법 : CsA를 복용하고 있는 환자의 치은조직에서 배양된 구강 섬유아세포를 실험군으로, 정상 치은조직에서 배양된 구강 섬유아세포를 대조군으로 하였다. 각각의 세포에 CsA의 자극 시간을 24시간, 48시간, 72시간으로 0, 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000ng/ml의 농도로 각각 시행하여, MMP-1, TIMP-1, TGF-β1, FGF-2, 그리고 FGF-7의 mRNA 발현을 관찰하였다. 결과 : MMP-1의 발현은 24시간, 48시간 자극실험에서 감소되는 경향을 보였고, TIMP-1의 발현은 24시간, 48시간, 72시간 모두에서 발현의 변화를 관찰할 수 없었다. TGF-β1은 72시간 자극에서, FGF-2는 48시간, 72시간의 자극에서 농도에 따른 증가가 관찰되었다. FGF-7은 48시간, 72시간의 자극에서 농도에 따른 감소를 관찰할 수 있었다. 결론 : CsA에 의한 치은 증식은 교원질 대사와 관련된 MMP-1, TGF-β1, FGF-2의 발현 변화와 관련되는 것으로 관찰되었고, 치은각화세포와 관련된 FGF-7 또한 감소되는 것으로 보아 치은섬유아세포에 의한 각화세포의 성장에 영향을 주는 것으로 판단된다.; Purpose : Cyclosporine A (CsA) is a widely used immunosuppresive agent with development of gingival overgrowth as a side effect. The mechanisms underlying this immunosuppressive activity are not fully understood. The progression of gingival overgrowth results from the accumulation of extracellular matrix. The purpose of this study was to investigate the several growth factors mRNA expression associated with CsA according to the induction time and dose. Materials & Methods : Gingival fibroblasts were obtained from gingival tissues of healthy donor and the patients treated with CsA. The cultured gingival fibroblasts were incubated with increasing concentration(0, 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000ng/ ml) of CsA for 24, 48, 72 hours, and the expression of MMP-1, TIMP-1, TGF-β₁, FGF-2 and FGF-7 was determined by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results : The expression of MMP-1 was slightly decreased according to the concentration of treated CsA in 24 and 48 hours stimulation. There was no change in TIMP-1 expression. TGF-β₁ showed the increased expression in 72 hours stimulation and FGF-2 expression was increased in 48 and 72 hours hours stimulation. Conclusions : We concluded that the gingival overgrowth might be related with TGF��131, N[W-1 and FGF-2 expression associated with collagen metabolism. And the FGF-7 associated with keratinocyte growth was significantly related with CsA gingival overgrowth. We also speculated that there was no cellular change associated with CsA induction in gingival fibroblast.