Alloxan에 의한 HIT-T15 세포 손상에 대한 쑥갓주정추출물의 세포보호효과

Abstract

본 논문은 Alloxan에 의한 HIT-T15 세포 손상에 대한 쑥갓주정추출물의 세포보호효과에 관한 연구로서 주요내용은 다음과 같다. 쑥갓에탄올추출물(Ethanol extract from Chrysanthemum cornarium L. var. spatiosum:CSE)이 alloxan이 유발하는 췌장 베타-세포(HIT-T15)의 산화스트레스에 미치는 항당뇨와 항산화효과를 평가하였다. CSE의 항당뇨 효과는 3-(4,5-dimethylthiazolyl-2)-2,5-diphenyltetrazoliu bromide(MTT) 세포증식 분석, lactate dehydrogenase(LDH) 유리 분석, $NAD^+$/NADH 비율과 인슐린 분비를 이용해 조사하였다. CSE가 alloxan으로 손상된 HIT-T15 세포의 항산화활성을 수반하는지 조사하기 위하여, superoxide dismutase, glutathione S-transferase, glutathione reductase와 glutathione peroxidase 등의 항산화효소 수치를 측정하였다. 분석 결과, HIT-T15 세포에서 alloxan은 세포 생존율을 유의하게 감소시켰고, LDH 방출을 증가시켰으며, $NAD^+$/NADH 비율과 인슐린 분비를 낮췄다. 그러나 CSE는 alloxan 처리된 세포의 생존율을 유의하게 증가시켰으며 LDH 방출을 감소시켰다. 100 ${\mu}g/m{\ell}$ CSE 처리 후, 세포외 NAD+/NADH 비율과 인슐린 분비는 각각 1.7배와 1.3배 유의하게 증가되었다. Alloxan 처리된 HIT-T15 세포는 항산화효소 활성의 유의한 감소를 보였으나 CSE가 항산화효소의 수치를 유의하게 상승시켰다. 결론적으로, CSE는 alloxan이 유도하는 산화스트레스 존재시 췌장세포의 세포독성과 기능장애에 대한 보호효과를 가진다는 내용이다. The objective of the present study was to evaluate the potential antidiabetic and antioxidant effect of the ethanol extract from Chrysanthemum cornarium L. var. spatiosum(CSE) against alloxan-induced oxidative stress in pancreatic β-cells, HIT-T15. In this study, the antidiabetic effect of CSE was examined using the 3-(4, 5-dimethylthiazolyl-2)-2, 5-diphenyltetrazoliu bromide(MTT) cell proliferation assay, lactate dehydrogenase(LDH) release assay, NAD+/NADH ratio and insulin secretion. To further investigate whether CSE is involved in the antioxidant activity of alloxan-damaged HIT-T15 cells, its antioxidant effect against alloxan-induced oxidative stress was measured in HIT-T15 cells by determining the levels of antioxidant enzymes including superoxide dismutase(SOD), glutathione S-transferase(GST), glutathione reductase(GR) and glutathione peroxidase(GPx). The results of this analysis showed that alloxan significantly decreased cell viability, increased LDH leakage, and lowered NAD+/NADH ratio and insulin secretion in HIT-T15 cells. However, CSE significantly increased the viability of alloxan-treated cells and lowered LDH leakage. The intracellular NAD+/NADH ratio and insulin secretion were also significantly increased by 1.7-fold and 1.3-fold, respectively, after treatment with 100 ㎍/㎖ CSE. The HIT-T15 cells treated with alloxan showed significant decreases in the activities of antioxidant enzymes, while CSE significantly elevated the levels of antioxidant enzymes. These findings suggest that CSE could have a protective effect against cytotoxicity and dysfunction of pancreatic cells in the presence of alloxan-induced oxidative stress.