HMGB1-R3V6 carrier와 Ym1/ Ym2 siRNA를 이용한 천식에서의 염증 조절

Abstract

천식은 세계에서 가장 흔한 만성 질환 중 하나로 간헐적인 호흡 장애와 기도 내의 만성적인 염증을 보인다. 천식에는 goblet cell hyperplasia, 기도 내 mucus의 증가, 면역세포의 증가 등의 증상이 나타나는 것이 알려져 있으나 정확한 메커니 즘은 잘 알려져 있지 않다. 또한 천식은 다양한 유전자와 환경 요인이 복합적으로 작용하는 질병으로 이런 특성은 천식의 치료를 힘들게 하고 있다. 이전에 단백체학을 통해 천식에서 특이적으로 발현되는 단백질을 찾는 연구가 있어왔고그를 통해 Ym1과 Ym2가 천식에서 특이적으로 발현된다는 것이 밝혀졌다. 본 연구에서는 Ym1, Ym2에 대한 siRNA를 이용한 RNA interference를 통해 천식을 치료하고자 하였으며, siRNA 단독으로는 세포에 효과적으로 전달할 수 없기에HMGB1 A box 와 R3V6 peptide를 유전자 전달의 carrier로써 사용하였다. 6주령의 마우스는 Ovalbumin을 통해 천식이 유도되었고 여기에 Ym1과 Ym2 siRNA와 HMGB1-R3VR 복합체를 기도 내 투여하였다. 마우스는 안락사 후 Bronchoalveolar lavage fluid와 폐 조직이 분리되었으며 differential cell counting, H&E staining과 PAS staining이 수행되었다. BAL cell의 differential cell counting 결과, 질병군에 비해 Ym1, Ym2 siRNA와 HMGB1-R3VR 복합체를 처리한 실험군에서 Eosinophil의 양과 전체 cell의 양이 현저히 줄어드는 것을 확인할 수 있었다. 또한 H&E staining과 PAS staining을 통해 질병군에서 늘어난 면역세포와 mucus의 분비가 치료제를 처리한 개체들에서 줄어드는 것을 확인할 수 있었다. 결론적으로 HMGB1-R3V6 carrier는 Ym1/ Ym2 siRNA와 잘 conjugation하며 세포로 siRNA를 전달할 수 있는 것이 확인되었으며, Ym1, Ym2 siRNA는 천식 모델에서 면역 세포의 증가와 mucus의 분비, goblet cell hyperplasia등의 증상을 억제시킨 다는 것이 밝혀졌다. 이런 결과를 통해 Ym1/Ym2 siRNA는 천식 치료에 있어 antiinflammatoryagent로의 응용 가능성을 볼 수 있었다.