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Modulation of Dendritic Cell Function by Genetic Modification

Title
Modulation of Dendritic Cell Function by Genetic Modification
Other Titles
유전적 제어를 통한 수지상세포의 기능 조절
Author
장수화
Alternative Author(s)
Jang, Su-Hwa
Advisor(s)
정희용
Issue Date
2007-02
Publisher
한양대학교
Degree
Master
Abstract
수지상세포의 성숙과 기능에 중요한 역할을 하고 있는 신호전달 경로를 다양한 dominant ?negative 형태의 신호전달 관련 유전자를 통하여 제어하고, 이러한 유전적 변형이 세포의 기능에 미치는 영향을 분석하여, 면역반응의 원특이적으로 제어할 수 있는 면역조절 dendritic cell 을 개발하는 것을 달하여 발현시키고 이들 유전자들의 발현의 dendritic cell의 성숙과 기능에 미치는 영향을 분석하였다. 이 culture system을 통한 수지상세포 회수율은 그렇지 않은 그룹에 비해 20배에 달하였고, MSCV retrovirus 를 통한 gene-tranduction 에서도 그 효과가 입증되었다. 유전자가 전달된 수지상세포들 중에서 GFP 와 CD11c 를 함께 발현하고 있는 세포들만 FACS 를 통하여 분리하였고, 이들을 surface phenotype 과 proliferation assay, cytokine profiling 을 통하여 표면적으로 그리고 기능적으로 control group 과 비교하여 성숙, 분화 그리고 기능적 변화를 분석 하였다.
We developed an efficient way of expanding large number of bone marrow-derived dendritic cells by initiating the culture with partially purified progenitor cells. The lineage marker-negative mouse bone marrow cells purified by magnetic cell separation system were used to initiate liquid culture in the presence of GM-CSF. In our system, the small number of lineage marker-negative cells used to initiate liquid culture and extensive cell expansion mediated by GM-CSF allow a window for efficient gene transduction by conventional retroviral vector system. By transducing the small number of enriched progenitor cells, instead of the whole population of bone marrow mononuclear cells, we were able to achieve between 70% to 30% infection rates. With this system we were able to sort CD11c-positive dendritic cells transduced with various genes with more than 90% purity, thereby allowing us to explore the effects of several dominant - negative MAP kinases on dendritic cell maturation and function in vitro. The effect of transducing dominant-negative form of JNK, ERK, p38 and Akt on dendritic cell maturation will be discussed.
URI
https://repository.hanyang.ac.kr/handle/20.500.11754/150319http://hanyang.dcollection.net/common/orgView/200000405461
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GRADUATE SCHOOL[S](대학원) > DEPARTMENT OF BIOMEDICAL SCIENCES(의생명공학과) > Theses (Master)
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