PTEN의 발현에 의한 MDA468 유방암 세포주의 phosphatidylinositol 3-kinase 저해제에 대한 민감성 회복

Abstract

유방암에서 유래한 phosphatase and tension homolog (PTEN)가 돌연변이된 MDA468 세포에 pBMN-PTEN-IRES-GFP 레트로바이러스 벡터로 PTEN을 인위적으로 발현시켜 PTEN의 발현 여부가 세포내 신호전달 및 세포의 성장에 미치는 영향을 관찰하였다. PTEN을 발현하는 MDA468 pBMN-PTEN 세포는 공벡터만 발현하는 MDA468 pBMN-vec 세포에 비하여 phospho-Akt의 양이 훨씬 적게 나타났고 phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/Akt 신호전달 억제제인 LY294002에 의한 phospho-Akt의 저해 효과도 더 크게 나타나는 것으로 관찰되었다. MDA468 pBMN-PTEN 과 MDA468 pBMN-vec 세포의 성장을 비교해 본 결과 PTEN을 도입한 MDA468 pBMN-PTEN의 성장 속도가 감소되어있는 것을 관찰하여 PI3K/Akt 신호전달이 세포의 성장에 필요하다는 것을 확인하였다. PI3K/Akt 신호전달 저해제인 LY294002와 Mitogen-activated protein kinase kinase (MAPKK)/mitogen-activated protein kinase (MAPK)의 저해제인 U0126가 MDA468 pBMN-PTEN과 MDA468 pBMN-vec의 세포 성장에 미치는 영향을 확인해 본 결과 MDA468 pBMN-PTEN이 MDA468 pBMN-vec에 비해 LY294002에 좀더 민감하게 세포 성장이 저해되는 것으로 나타났고 U0126의 효과는 두 세포주 모두 동일한 것으로 관찰되었다. 이 결과들은 PTEN이 돌연변이 되어있는 MDA468 pBMN-vec 암세포의 성장 억제를 위해서는 PI3K/Akt 신호전달 경로 보다는 다른 경로를 저해하는 것이 좀 더 효과적이라는 것을 의미한다.; To investigate the effect of forced expression of PTEN (phosphatase and tensin homolog) on intracellular signaling and cell proliferation, PTEN-null MDA468 breast cancer cells were transduced with pBMN-PTEN-IRES-EGFP retroviral vector. MDA468 pBMN-PTEN which overexpresses PTEN shows decrease level of phospho-Akt as compared to MDA468 pBMN-vec cells. When LY294002, an inhibitor of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/Akt signaling, was used to inhibit PI3K activity in these cells, MDA468 pBMN-PTEN cells exhibited enhanced sensitivity to LY294002 in terms of Akt phosphorylation when compared to vector control cells. Proliferation of MDA468 pBMN-PTEN cells was severly impaired as compared to vector control cells, confirming that PI3K/Akt signaling is required for cell proliferation. When U0126, an inhibitor of mitogen activated protein kinase kinase (MAPKK)/mitogen activated protein kinase (MAPK) was used in parallel with LY294002, it was shown that MDA468 pBMN-PTEN cells exhibited enhanced susceptibility to LY294002 than vector control cells while U0126 has almost the same effect on both cell lines. Taken together, these results suggest that inhibition of intracellular signaling cascades other than PI3K/Akt is required for the efficient inhibition of PTEN-null MDA468 pBMN-vec cells.